登录 注册
登录
欢迎登录纳谱分析
忘记密码？
欢迎注册纳谱会员

服务与支持

服务与支持

我们的服务

知识共享

案例分享

用户文献

服务与支持

当前位置：首页>服务与支持>案例分享>中药农残测定
中药丹参的33种农残测定分析

丹参为唇形科鼠尾草属多年生草本植物，其药用部位为干燥根以及根茎。长期以来，丹参以其广泛的药理活性为医药界做出了巨大的贡献。走访中药检测机构，普遍抱怨丹参的农残测定非常的不稳定，这个主要是由于丹参药材含有大量的菲醌类化合物，这些成分特别容易造成有机磷类化合物降解，从而导致目标物线性差、回收率低、甚至丢峰。GCMSMS分析中由于基质复杂及易导致甲基对硫磷、对硫磷、甲基硫环磷等化合物拖尾，峰形变差，LCMSMS分析中内吸磷、甲拌磷、涕灭威经常丢峰，药典规定的四种前处理方法都不能很好的使有机磷类农药化合物更稳定。

纳谱分析近期针对丹参样品分析存在的问题，调整填料比例，特别推出SelectCore QuEChERS Pesticide Residue A07(丹参中药农残Q法)净化管，处理后的丹参样品溶液，溶液稳定性好，农残回收率数据重现性良好。

适用范围

本方法参考中国药典2020版2341第五法中的快速样品处理法（QuEChERS）法。

实验步骤

一

对照品溶液的制备

1.1 混合对照品配制

精密量取禁用农药混合1mL，置20mL量瓶中，加乙腈稀释至刻度，摇匀，备用；

1 .2 气相色谱-串联质谱法分析用内标溶液的制备

取磷酸三苯酯对照品适量，精密称定，加乙腈溶解并制成每1mL含1.0mg的溶液，即得。精密量取适量，加乙腈制成每1mL含0.1μg的溶液。

1.3 空白基质溶液的制备

取丹参空白基质样品，同供试品溶液的制备方法处理制成空白基质溶液。

1.4 基质混合对照溶液的制备

分别精密量取空白基质溶液1.0mL(6份），置氮吹仪上，40°C 水浴浓缩至约0.6mL，分别加入混合对照品溶液10μL、20 μL、50 μL、100μL、150μL、200μL，加乙腈稀释至1mL，涡旋混匀，即得。

二

供试品溶液的制备

2.1 提取

取供试品粉末(过三号筛)3g，精密称定，置50mL聚苯乙烯具塞离心管中，加入1%冰醋酸溶液15mL，涡旋使药粉充分浸润，放置30分钟，精密加入乙腈15mL，涡旋使混匀，置振荡器上剧烈振荡(500次/分)5分钟，加入SelectCore QuEChERS 萃取盐包 6g MgSO4, 1.5g NaOAc（QS-002），立即摇散，再置振荡器上剧烈振荡(500次/分)3分钟，于冰浴中冷却10分钟，离心(4000转/min)5分钟，待净化。

三

净化

GCMSMS样品：

  • SPE净化管：SelectCore QuEChERS 净化管 15mL, Pesticide Residue A07(丹参中药农残Q法)

  • 净化：取上述提取液上清液9mL置上述净化管中涡旋使充分混匀，置振荡器上剧烈振荡(500次/分)5分钟使净化完全，离心(4000转/min)5分钟，即得。

  • GC/MS/MS测定：精密吸取上清液5mL，置氮吹仪上于35°C 水浴浓缩至约0.4mL，加入混合对照品液再加乙腈稀释至1.0mL，涡旋混匀，再加入0.3 mL磷酸三苯酯溶液，混匀，过0.22μm尼龙针式过滤器，上机分析。

  • LC/MS/MS测定：精密吸取上清液5mL，置氮吹仪上于35℃水浴浓缩至约0.4mL，加入混合对照品液再加乙腈稀释至1.0mL，涡旋混匀，再加入0.3 mL水，混匀，过0.22μm尼龙针式过滤器，上机分析。


注意事项：由于GCMSMS分析时间较长，为保证丹参分析数据的准确性，GCMSMS分析建议先提取前加标样品，上机分析后，再处理丹参样品和空白基质溶液，待前加标样品液分析完成后即刻分析丹参样品液，待丹参样品液全部分析完成后再配制基质加标的6个浓度点设置批处理，LCMSMS可直接设置批处理分析。


四

气相色谱-串联质谱法

（岛津 GC-MS -TQ8040 NX）

色谱条件

  • 色谱柱：SHIMADZU SH-Rxi-17Sil MS，30m×0.25mm, 0.25μm;

  • 进样口温度：250℃；

  • 升温程序：初始温度为60℃，保持1min；以10℃/min升温至160℃；再以2℃/min升温至230℃，最后以15℃/min升温至300℃，保持6min；

  • 载气：高纯氦气（纯度>99.999%）；

  • 进样方式：不分流进样；

  • 恒压模式：146kPa；

  • 进样量：1μL。

质谱条件

  • 电离方式：电子轰击电离源（EI）；

  • 电离能量：70Ev；

  • 接口温度：250℃；

  • 离子源温度：250℃；

  • 监测方式：多反应检测模式（MRM）；

  • 溶剂延迟：10.0min。

注意事项：

  • 杀虫脒参考LCMSMS分析数据更好；

  • 甲基对硫磷

    定量离子：263.10>109.00 CE：13 

    参考离子：125.00>47.00 CE：10

  • β -硫丹

    定量离子：206.80>171.80 CE：15 

    参考离子：194.80>159.00 CE：10

  • 小建议：做完丹参后建议290℃老化色谱柱2h，或截取掉色谱柱进样口端30cm色谱柱后再进行其他样品的分析。


五

高效液相色谱-串联质谱法

（岛津 LC-MS 8045）

色谱条件

  • 色谱柱：ChromCore C18-MS Pesticides中药农残专用柱(2.1 ×100 mm，2.6μm)

  • 流动相：

    A：0.1%甲酸水溶液（含有5mmol/L甲酸铵）

    B：乙腈-0.1%甲酸水溶液（含有5mmol/L甲酸铵）=95:5

  • 梯度：

时间

（min）

流速

（mL/min）

流动相A

（%）

流动相B

（%）

0

0.3

70

30

1

0.3

70

30

12

0.3

0

100

14

0.3

0

100

14.1

0.3

70

30

16

0.3

70

30

  • 流速: 0.3mL/min

  • 柱温: 40℃

  • 进样量: 2µL

质谱条件


  • 离子源: 电喷雾离子源（Electrospray ionization，ESI）正离子扫描

  • 监测方式：多反应监测（Multiple Reaction Monitoring，MRM）

  • 离子源接口电压：4.5kV

  • 雾化气：氮气3.0L/min

  • 加热气：干燥空气10.0L/min

  • DL温度：250℃

  • 加热模块温度：400℃

  • 接口温度：300℃

  • 干燥气：N2 10L/min

注意事项：

  • 久效磷参考GCMSMS分析数据更好；

  • 水胺硫磷

    定量离子：291.00>231.00 CE：-15

    参考离子：291.00>121.00 CE：-30

  • 甲拌磷砜

    定量离子：293.00>114.90 CE：-25 

    参考离子：293.00>171.15 CE：-11

  • 小建议：做完丹参样品分析后，建议清洗离子源后再进行其他样品的分析。

六

目标物对比图

丹参直接提取法（固1、固2净化）和SelectCore QuEChERS Pesticide Residue A07(丹参中药农残Q法) 15mL目标物对比图

image.png

image.png

image.png

七

添加回收率

image.png


八

稳定性对比


image.png


九

实验讨论



通过以上实验数据比对，可以看出SelectCore QuEChERS Pesticide Residue A07(丹参中药农残Q法) 15mL净化管，解决了丹参中由于大量菲醌类化合物引起的有机磷农药降解过快而导致分析结果不准确的问题，经过以上方案处理后各目标物回收率、线性、峰形均较为良好，为丹参的农药残留实验数据的稳定性和可靠性提供了良好的帮助。



© 2022 纳谱分析技术（苏州）有限公司版权所有. 备案号：苏ICP备18035781号-1