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食品合成着色剂,也称为食品合成染料,是用人工合成方法所制得的有机着色剂。合成着色剂因其着色力强、色泽鲜艳、不易褪色、稳定性好、易溶解、易调色、成本低等特点,被广泛应用到食品的加工过程中,但因其过量食用对人体健康造成危害,所以其检测的方法的稳定性和准确性至关重要。
纳谱分析依据国标推出了SelectCore QMA固相萃取柱,其除杂效果好,回收率高且稳定。
适用范围
参照GB/T 21916-2008 中华人民共和国国家标准 水果罐头中合成着色剂的测定 高效液相色谱法,本标准适用于水果罐头中柠檬黄、苋菜红、靛蓝、胭脂红、日落黄、诱惑红、亮蓝、赤藓红人工合成着色剂的测定。
实验步骤
1、试剂的准备
乙酸铵溶液(0.02 mol/L):称取1.54 g乙酸铵,加水溶解,定容至1000 mL,经0.45 μm过滤器过滤。
无水乙醇-氨水溶液:量取无水乙醇80 mL,氨水1 mL,加水定容至100 mL,混匀。
pH8的50%甲醇溶液:量取甲醇50 mL,加水定容至100 mL,混匀,加氨水调pH值到8。
pH8的水:水加氨水调pH值到8。
2%氨水:量取氨水2 mL,加水定容至100 mL,混匀。
盐酸-乙醇溶液(1+9):量取10 mL盐酸、90 mL乙醇,混匀。
50%甲醇溶液:量取甲醇50 mL,加水定容至100 mL,混匀。
2、样品的制备
将黄桃罐头整份试样用匀浆机打碎,再搅拌均匀,准确称取2.00 g样品(精确至0.01 g),装入离心管中。加10 mL无水乙醇-氨水溶液,涡旋0.5 min,再3000 r/min离心10 min,将上清液倒入塞有脱脂棉的玻璃漏斗中过滤,将剩余残渣再重复操作三次,将收集的滤液(约40 mL)置于80℃水浴中浓缩至约2 mL,为试样溶液。
3、固相萃取方法
活化:SelectCore QMA 360mg/6mL固相萃取柱,依次使用5.0 mL甲醇、5.0 mL水活化;
上样:取步骤2中制备好的待净化液上样至固相萃取柱上,弃去流出液;
淋洗:依次使用3.0 mL pH8的水和3.0 mL pH8的50%甲醇淋洗,弃去淋洗液;
洗脱:用10.0 mL盐酸-乙醇溶液(1+9)将着色剂洗脱出固相萃取柱,收集全部洗脱液,用氨水中和,在80 ℃下水浴浓缩至尽干,冷却后用50%的甲醇溶液溶解并定容至10.0 mL,经0.45 μm滤膜过滤后使用高效液相色谱仪进行测定。
4、高效液相色谱仪器条件
Column: ChromCore C18-AC,5 μm
Dimension: 4.6×250 mm
Mobile Phase:A) 乙酸铵溶液(0.02 mol/L)
B)甲醇
Gradient:
时间 (min) | 流速 (mL/min) | 流动相A (%) | 流动相B (%) |
0.01 | 1.0 | 90 | 10 |
5.00 | 1.0 | 80 | 20 |
12 | 1.0 | 30 | 70 |
10.00 | 1.0 | 20 | 80 |
16.00 | 1.0 | 20 | 80 |
17.00 | 1.0 | 90 | 10 |
25.00 | 1.0 | 90 | 10 |
Temperature: 30 °C
Injection: 10 μL
Detection: 如下
合成着色剂名称 | 时间 | 波长切换 |
柠檬黄 | 0.01 | 428 |
苋菜红 | 6.80 | 521 |
靛 蓝 | 8.00 | 608 |
胭脂红 | 9.30 | 509 |
日落黄 | 10.30 | 483 |
诱惑红 | 10.90 | 507 |
亮 蓝 | 11.50 | 625 |
赤藓红 | 12.90 | 529 |
5、实验谱图
Peaks:
1. 柠檬黄 2. 苋菜红 3. 靛蓝 4. 胭脂红
5. 日落黄 6. 诱惑红 7. 亮蓝 8. 赤藓红
6、加标回收率结果
7、实验结论
由实验谱图和加标回收率结果可以看出,使用SelectCore QMA固相萃取柱,8种合成着色剂的回收率均符合检测要求,并且检测结果准确可靠。温馨提示,因部分合成着色剂在酸性条件下不稳定,所以在实验过程中,收集的洗脱液要用氨水中和再进行下一步操作,才能保证回收率达到检测要求。
详细产品信息:
产品描述 | 货号 |
SelectCore QMA固相萃取柱360mg/6mL; 30/pkg | QMA050-060360-1 |
ChromCore C18-AC 5μm, 4.6×250mm | S009-050018-04625S |