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在分子生物学实验中,如载体克隆、细胞转染、病毒包装、重组蛋白制备等,质粒DNA的纯度直接关乎实验成功与否。科研人员常面临着一项关键挑战:如何在复杂生物样本中高效、纯净地提取质粒DNA,同时去除诸如RNA、内毒素等杂质,以确保实验数据的准确性和后续应用的可靠性。
质粒是存在于生物染色体之外,具有自行复制能力,且能在子代中保持恒定拷贝数,并表达其所携带的遗传信息的双链闭环DNA分子。质粒具有稳定可靠和操作简便的优点,所以成为基因工程中最常用的载体,可行使基因递送、分子克隆和目的基因表达等多种重要功能。
正是在这一背景下,纳谱分析凭借其在微球制造技术与表面修饰领域的深厚积累,推出了革命性的SelectCore Plasmid-A系列质粒抽提柱产品,为质粒提取工作提供高效、精准的解决方案。现在,让我们一起来了解下吧!
纳谱分析推出的SelectCore Plasmid-A系列的质粒抽提柱产品,是基于自主开发的微球制造工艺及先进的表面修饰技术,通过离子交换吸附结合目标DNA,再经过漂洗步骤去除RNA和内毒素等杂质,洗脱获得高纯度的质粒DNA,可用于DNA测序、酶切、标记、细胞转染、显微注射、基因转移、基因治疗及疫苗制备等多种研究。
○ 规格多:产量多至mg级别质粒DNA
○ 纯度稳定:A260/A280在1.8-2.0之间
○ 去内毒素效率高:内毒素含量<0.1 EU/µg
○ 适用范围广:适用于高拷贝或低拷贝质粒提取
○ 操作方便:免去离心步骤,通过重力柱法,高效制备转染级质粒
质粒裂解液制备:称取0.5 g菌泥,加入10 mL裂解液Ⅰ,充分混匀,缓慢加入10 mL裂解液Ⅱ和10 mL裂解液Ⅲ,混合均匀后,加入ER去除内毒素溶液3 mL,冰浴10 min,4000 r/min离心15 min后,取上清液,备用。
1.质粒抽提柱过柱过程
SelectCore Plasmid-A 500
(1) 活化:加入30 mL平衡液进行活化;
(2) 上样:质粒裂解液上样30 mL,重力流出,弃去流出液;
(3) 漂洗:使用30 mL漂洗液进行漂洗,弃去流出液;
(4) 洗脱:使用15 mL洗脱液进行洗脱,收集全部洗脱液,测定。
如需了解实验溶液配制过程,可联系纳谱分析工作人员。
2.实验结果