对照品溶液的制备

1.1 混合对照品配制

精密量取禁用农药混合1mL，置20mL量瓶中，加乙腈稀释至刻度，摇匀，备用；

1 .2 气相色谱-串联质谱法分析用内标溶液的制备

取磷酸三苯酯对照品适量，精密称定，加乙腈溶解并制成每1mL含1.0mg的溶液，即得。精密量取适量，加乙腈制成每1mL含0.1μg的溶液。

1.3 空白基质溶液的制备

取空白基质样品，同供试品溶液的制备方法处理制成空白基质溶液。

1.4 基质混合对照溶液的制备

分别精密量取空白基质溶液1.0mL(6份），置氮吹仪上，40°C 水浴浓缩至约0.6mL，分别加人混合对照品溶液10μL、20 μL、50 μL、100μL、150μL、200μL，加乙腈稀释至lmL，涡旋混匀，即得。

供试品溶液的制备

2.1 提取

称取5g厚朴样品，加氯化钠1g，加入50mL乙腈，匀浆处理2分钟，离心后分取上清液，残渣再加50mL乙腈，匀浆处理1分钟，离心后，合并两次提取上清液，减压浓缩至3~5mL，加乙腈定容至10mL，摇匀，待净化。

净化

• SPE柱：SelectCore HLB-A中药农残专用固相萃取柱（200mg/6mL）

• 净化1：量取直接提取法制备的供试品溶液3mL，过SelectCore HLB-A中药农残专用固相萃取柱，收集全部净化液，混匀，即得。如净化1方式磺隆类成分回收率较低，可以再结合下面的净化2的回收率数据；

• 净化2：量取直接提取法制备的供试品溶液5mL，过SelectCore HLB固相萃取柱，收集全部净化液，混匀；

• GC/MS/MS测定：取过固相萃取柱后溶液1mL，加入0.3 mL内标溶液，混匀，过PTFE膜，上机分析。

• LC/MS/MS测定：取过固相萃取柱后溶液1mL，加入0.3 mL水，混匀，过PTFE膜，上机分析。

处理后溶液的颜色比对

由上图可以看出，厚朴提取液经过SelectCore HLB-A中药农残专用柱净化后样品颜色澄清透明，而常规HLB柱净化后样品颜色较深。

高效液相色谱-串联质谱法

（岛津 LC-MS 8050）

• 色谱柱：ChromCore C18-MS Pesticides中药农残专用柱(2.1 ×100 mm，2.6μm)
  

• 流动相：

  A：0.1%甲酸水溶液（含有5mmol/L甲酸铵）

  B：乙腈/0.1%甲酸水溶液（含有5mmol/L 甲酸铵）=95/5

• 梯度：

• 流速: 0.3 mL/min
  

• 柱温: 40 ℃

• 进样量: 1 µL

• 离子源: 电喷雾离子源（Electrospray ionization，ESI）正离子扫描

• 监测方式：多反应监测（Multiple Reaction Monitoring，MRM）

• 离子源接口电压：4.5kV

• 雾化气：氮气3.0L/min

• 加热气：干燥空气10.0L/min

• DL温度：250℃

• 加热模块温度：400℃

• 接口温度：300℃

• 干燥气：N₂ 10 L/min

气相色谱-串联质谱法

（岛津 GC-MS 8030）

• 色谱柱：DB-17MS，30m×0.25mm，0.25μm;

• 进样口温度：250℃；

• 升温程序：初始温度为60℃，保持1min；以10℃/min升温至160℃；再以2℃/min升温至230℃，最后以15℃/min升温至300℃，保持6min；

• 载气：高纯氦气（纯度>99.999%）；

• 进样方式：不分流进样；

• 恒压模式：146kPa；

• 进样量：1μL。

• 电离方式：电子轰击电离源（EI）；

• 电离能量：70Ev；

• 传输线温度：250℃；

• 离子源温度：250℃；

• 监测方式：多反应检测模式（MRM）；

• 溶剂延迟：10.0min。

厚朴过HLB与HLB-A SPE柱的

部分农残基质响应的区别

（左边为HLB，右边为HLB-A）

实验讨论

通过以上实验数据比对，可以看出SelectCore HLB-A中药农残专用固相萃取柱对厚朴溶液颜色有很好的净化效果，容易干扰检测的挥发油类物质和酚类物质都得到了较好的净化，不仅保护了分析柱和离子源，还极大的消除了由于基质效应带来的检测灵敏度下降等问题。该方法不需要固相萃取柱活化步骤，提取液直接过柱就可以测定，过柱时间花费不到5分钟，不仅操作便捷，对于33种农残成分的峰形均有明显改善。