在操作高效液相色谱时，你有没有为老是出现气泡而崩溃？

有没有为超声波震荡了一个小时，流动相还出现气泡，而晕倒？

有没有为天气晴好的时候没出现气泡，阴天、下雨天，同一瓶，出现了气泡，而对自己的工作失去信心？

在操作高效液相色谱时，流动相出现气泡，那整个工作就变得非常困难。

超声波震荡了一个小时的流动相，为什么天气晴好的时候没出现气泡，阴天、下雨天就会出现；

是因为阴天、下雨天空气气压下降，引起溶在流动相中的空气过饱和（晴天时气压高还没饱和），当高压泵抽取流动相时，空气析出，产生了气泡。

超声波震荡了一个小时的流动相，为什么里面还有空气呢？

这是由于在常压下震荡，驱赶空气效果不行。

如果把装流动相的瓶子进行抽真空，同时进行超声波震荡，效果会怎么样呢？

效果非常好，只要1min，流动相中的空气差不多没了；

经过这样驱逐空气的流动相，阴天、下雨天使用也不会出现气泡了；

而且省时，不用动不动半小时、一小时超声波震荡；

并且效果非常好。

由于气泡的存在，会造成色谱图上出现尖锐的噪声峰，严重时会造成分析灵敏度下降；

气泡变大进入流路或色谱柱时会使流动相的流速变慢或不稳定，使基线起伏。

气泡产生原因及解决办法

1. 故障原因：溶剂混合时，由于两种液体热力学体积的变化，会产生气泡；混合时放热或者吸热易产生气泡，比如：甲醇和水混合属于放热，乙腈和水混合属于吸热。通常用量筒混合后明显看到体积的增减，而且有许多小气泡产生，挂在瓶壁上，或者晃一下可以看到许多小气泡存在液体中。 

故障排除：对溶剂过滤，超声脱气（常用），尤其是乙腈和水混合后，超声脱气时间要长一些，也可以通过其他方法脱气，例如安装在线脱气机，充氮脱气等。处理好的液体在使用过程中应该保持室内温度恒定。

2. 故障原因：溶剂滤头污染，导致泵在吸液过程中吸力不均匀而强制吸液从而产生微小的真空气泡。此时会观察到进液管壁上分布许多很小的气泡，有的在动有的停留在管壁上，或者感觉流速比设定值小，压力也不稳。

故障排除：先观察现象确认，再排除。用5%—10%的稀硝酸浸泡过夜（怕超声的滤头）或者超声处理数小时（可以超声的滤头），然后用纯水浸泡过夜或者超声处理，注意换水多处理几次，洗掉酸的残留，最后用有机相甲醇浸泡处理或者超声即可。若上述处理未果，需更换新的溶剂滤头。

3. 故障原因：流动相放好后，没有排气，就开始运行泵，易产生气泡。

故障排除：放好流动相后，打开旁通阀，用注射器慢慢吸液，观察进液管无气泡后再吸10ml将流路中的空气驱赶干净，旋紧旁通阀后再运行泵，或者是打开旁通阀大流速排液，观察进液管无气泡后，再排气2min将流路中的空气驱赶干净，旋紧旁通阀后再运行泵。

4. 故障原因：单向阀或者泵头内部污染。（泵的压力波动一般在100psi以上就要考虑了）泵头是压力变化最剧烈的地方，也是最易产生气泡的地方，泵头靠负压而吸液，而负压必然使流动相中的小气泡长大，当泵腔变正压时，已长大的气泡未必能全部变小流入后续液路，则泵腔内将积存气泡，从而影响吸液精度。

故障排除：小心拆下泵头，用甲醇超声清洗单向阀以及内部密封圈和泵头整体，用棉花沾甲醇擦拭柱塞杆。必要时更换单向阀，密封圈，柱塞杆等。

5. 故障原因：进样时带入气泡，吸样时带到进样针中气泡 

故障排除：在进样前，注意排出进样针里的空气，将进样针头垂直向上，用手指垫上滤纸摁住针头处，往上推，气泡很容易就上去了，排出即可。

6. 故障原因：色谱柱进气泡 

故障排除：用纯甲醇低流速（0.2-0.3ml/min）长时间冲洗反相色谱柱，随后可逐步加大流速，最大加到1ml/min，直至色谱柱压力稳定。或者更换色谱柱。 

7. 故障原因：流通池是易积存气泡的地方，其对基线影响较大，流动相流入色谱柱后，压力越来越小，微小气泡将逐渐长大，而流通池截面积相对较大，则气泡在池内易长大，在无外压的情况下，很难缩小到管路内径以下流出流通池，从而存在了池内，导致基线很乱。

故障排除：在废液出口处加反压调节器（压力一般在150psi左右），为流通池提供一个背压；其次是用手指堵废液管出液端，眼看泵柱压上升（约2-3s），松开，且同时看检测器显示屏上吸光度值的变化。如果池内有气泡，则手指堵废液管，吸光度值将剧烈变化，当手松开后吸光度值再次大步上升，证明池内有气泡但没有排掉，当手指堵住和松开废液管时，吸光度值基本不变时，证明排气泡成功，再观察基线将稳定（此过程需要重复10-20次）。

以上为等度系统气泡的故障排除，望各位同行和工作者多多指教，商榷。给予纠正，有不妥之处，及时沟通。

文章来源于网络，转载只为分享知识，如涉及版权问题，请与本公司联系删除