对照品溶液的制备

1.1 混合对照品配制

精密量取禁用农药混合1mL，置20mL量瓶中，加乙腈稀释至刻度，摇匀，备用；

1.2 气相色谱-串联质谱法分析用内标溶液的制备

取磷酸三苯酯对照品适量，精密称定，加乙腈溶解并制成每1mL含1.0mg的溶液，即得。精密量取适量，加乙腈制成每1mL含0.1μg的溶液。

1.3 空白基质溶液的制备

取金银花空白基质样品，同供试品溶液的制备方法处理制成空白基质溶液。

1.4 基质混合对照溶液的制备

分别精密量取空白基质溶液1.0mL(6份），置氮吹仪上，40°C 水浴浓缩至约0.6mL，分别加入混合对照品溶液10μL、20 μL、50 μL、100μL、150μL、200μL，加乙腈稀释至1mL，涡旋混匀，即得。

供试品溶液的制备（固相萃取法）

2.1提取：

取金银花粉末（过3号筛）5 g，精密称定，加氯化钠1 g，加入50 mL乙腈，匀浆处理2 min，离心后分取上清液，残渣再加50 mL乙腈，匀浆处理1 min，离心后，合并两次提取上清液，减压浓缩至3~5 mL，加乙腈定容至10 mL，摇匀，待净化。

2.2净化：

注意事项：

• GCB/NH₂-II固相萃取柱需要提前进行活化平衡，该过程可以用SPE转接头加快溶剂活化速度；

• 上样后流出液和后续洗脱液都要接收，上样过程中可通过自重力将样品进行过柱，而洗脱过程中如滴速较慢，也可选择SPE转接头加快过柱速度；

GC-MS/MS测定

（气相色谱-串联质谱法）

精密量取上述减压回收后的样品溶液1 mL，氮吹至0.4 mL加入混合对照溶液，乙腈定容至1 mL，再加入0.3 mL磷酸三苯酯溶液，混匀，过0.22 μm尼龙针式过滤器，上机分析。

色谱条件

• 色谱柱：SHIMADZU SH-Rxi-17Sil MS，30m×0.25mm, 0.25μm;

• 进样口温度：250℃；

• 升温程序：初始温度为60℃，保持1min；以10℃/min升温至160℃；再以2℃/min升温至230℃，最后以15℃/min升温至300℃，保持6min；

• 载气：高纯氦气（纯度>99.999%）；

• 进样方式：不分流进样；

• 恒压模式：146kPa；

• 进样量：1μL。

质谱条件

• 电离方式：电子轰击电离源（EI）；

• 电离能量：70Ev；

• 接口温度：250℃；

• 离子源温度：250℃；

• 监测方式：多反应检测模式（MRM）；

• 溶剂延迟：10.0min。

LC-MS/MS测定

（高效液相色谱-串联质谱法）

精密量取过固相萃取柱后溶液1 mL氮吹至0.4 mL加入混合对照品液，乙腈定容至1 mL，再加入0.3 mL水，混匀，过0.22 μm尼龙针式过滤器，上机分析。

色谱条件

• 色谱柱：ChromCore C18-MS Pesticides中药农残专用柱(2.1 ×100 mm，2.6μm)

• 流动相：

  A：0.1%甲酸水溶液（含有5mmol/L甲酸铵）

  B：乙腈-0.1%甲酸水溶液（含有5mmol/L甲酸铵）=95:5

• 梯度：

• 流速: 0.3mL/min
  

• 柱温: 40℃

• 进样量: 2µL

质谱条件

• 离子源: 电喷雾离子源（Electrospray ionization，ESI）正离子扫描

• 监测方式：多反应监测（Multiple Reaction Monitoring，MRM）

• 离子源接口电压：4.5kV

• 雾化气：氮气3.0L/min

• 加热气：干燥空气10.0L/min

• DL温度：250℃

• 加热模块温度：400℃

• 接口温度：300℃

• 干燥气：N₂ 10L/min

LCMSMS监测目标物注意事项：

挥发油基质，自动进样器温度不宜设置过低，否则可能出现分层导致分析结果不准确；

实验结果

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