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黄曲霉毒素(图片源于网络,侵删)
黄曲霉毒素是一类化学结构类似的化合物,是黄曲霉、寄生曲霉产生的次生代谢产物,它们存在于土壤、动植物、各种坚果中,特别容易污染花生、玉米、稻米、大豆、小麦等粮油产品,是霉菌毒素中毒性最大、对人类健康危害极为突出的一类霉菌毒素。
为了避免“毒从口入”的情况,纳谱分析的SelectCore AFT Total免疫亲和柱成为检测黄曲霉毒素的有效工具。
适用范围 本方法参照GB 5009.22-2016 食品安全国家标准 食品中黄曲霉毒素B族和G族的测定 第三法 高效液相色谱-柱后衍生法,适用于谷物及其制品、豆类及其制品、坚果及籽类、油脂及其制品、调味品、婴幼儿配方食品和婴幼儿辅助食品中AFT B1、AFT B2、AFT G1和AFT G2的提取与检测。 实验步骤 一 / 溶液配制 磷酸盐缓冲液:称取8.00 g氯化钠、1.20 g磷酸氢二钠、0.20 g磷酸二氢钾、0.20 g氯化钾,用900 mL水溶解,用盐酸调节pH至7.4,用水定容至1000 mL。 二 / 样品制备 称取5 g试样(精确至0.01 g)于50 mL离心管中,加入20 mL乙腈-水溶液(84+16),涡旋混匀,超声20 min,在4000 r/min下离心10 min,准确移取4 mL上清液,加入46 mL磷酸盐缓冲液,混匀,备用。 三 / 固相萃取方法 SelectCore AFT Total免疫亲和柱3mL (1)亲和柱预处理:取出亲和柱,恢复至室温(22-25 °C),亲和柱连接于注射器下,打开下端堵头,将柱内保存液流尽; (2)上样:移取样品制备中的溶液注入注射器筒中,调节下滴速度,控制样液以1 mL/min~3 mL/min的速度稳定下滴; (3)淋洗:待上样液滴完后,往注射器筒内加入2×10 mL水,以稳定流速淋洗免疫亲和柱,待水滴完后,抽干亲和柱; (4)洗脱:准确加入1.5 mL甲醇洗脱亲和柱,控制1 mL/min~3 mL/min的速度下滴,再抽干亲和柱,收集洗脱液于2 mL容量瓶中,加水定容,过0.22 μm尼龙针式滤器,供检测用。 四 / 液相色谱-光化学柱后衍生器-荧光检测器条件 Column:ChromCore 120 C18 5μm, 4.6×250mm; Mobile Phase:47/53 v/v甲醇/水 Flow rate:1.0 mL/min Temperature:30 °C Injection:50 μL 光化学柱后衍生器:254 nm Detection: EX:360 nm Em:440 nm 实验谱图 △图1 四种黄曲霉毒素标准品、花生油样品、花生油样品加标对比图 加标回收率 五 / 实验结论 由实验谱图可以看出,纳谱分析的ChromCore 120 C18可以将4种黄曲霉毒素有效分离,并且花生油样品也没有杂质干扰;4种黄曲霉毒素的加标回收率均大于95%,完全满足测定要求。 相关产品信息 …… 产品货号信息 ChromCore 120 C18 5μm, 4.6×250mm A001-050012-04625S AFTT100-030300-2 保护柱及柱芯 ChromCore 120 C18 5μm, 4.6x10mm A001-050012-04601S Guard-04601S-CS产品描述 货号 产品描述 货号